Φυσικά αντιοξειδωτικά ως συντηρητικά γαλακτωμάτων. Μελέτη αλληλεπίδρασης με τις βασικές πρώτες ύλες
Natural antioxidants as emulsion preservatives. Interaction study with basic raw materials
Μεταπτυχιακή διπλωματική εργασία
Author
Μιχαήλ, Αιμιλία Ιωάννα
Date
2022-07-05Advisor
Karathanos, VaiosKeywords
Γαλακτώματα ; Φυτικές πρωτεΐνες ; Εκχύλισμα φρούτωνAbstract
Στην παρούσα διπλωματική μελέτη πραγματοποιήθηκε η αξιολόγηση τεσσάρων διαφορετικών ειδών εμπορικών σκευασμάτων πρωτεΐνης φυτικής προέλευσης (σόγια, μπιζέλι, φάβα, ρύζι) για την χρήση τους ως γαλακτωματοποιητές με στόχο την παρασκευή σταθερών γαλακτωμάτων τύπου λάδι σε νερό. Ταυτόχρονα, εξετάστηκε η χρήση εκχυλίσματος φρούτων (βύσσινο) ως φυσικό αντιοξειδωτικό για την μελέτη αναστολής της οξείδωσης των λιπαρών των γαλακτωμάτων.
Οι παράγοντες που μελετήθηκαν στα γαλακτώματα αφορούν, τις συνθήκες παρασκευής τους (συγκέντρωση λαδιού, συγκέντρωση πρωτεΐνης και περιβαλλοντικές συνθήκες), την σταθερότητα τους στην διάρκεια του χρόνου αλλά και τους παράγοντες οξείδωσης των λιπαρών παρουσία ή μη αντιοξειδωτικών ενώσεων. Στην μέχρι τώρα βιβλιογραφία έχουν μελετηθεί οι τρόποι δημιουργίας των γαλακτωμάτων, οι διαφορετικοί τρόποι παραλαβής πρωτεϊνών φυτικής προέλευσης καθώς επίσης η σταθερότητα των γαλακτωμάτων σε διαφορετικούς χρόνους. Παρόλα αυτά δεν υπάρχει αρκετή βιβλιογραφία να αναφέρεται σε σκευάσματα εμπορικών πρωτεϊνών.
Κατά την πειραματική διαδικασία εξετάστηκαν η διαλυτότητα και η ικανότητα απορρόφησης των πρωτεϊνών σε λάδι, νερό και σε αντικατάσταση αυτού από υδραλκοολικό διάλυμα. Μετρήθηκαν επίσης οι δείκτες σταθερότητας των γαλακτωμάτων (ESI) και οι δείκτες ικανότητας δημιουργίας γαλακτωμάτων (EAI). Στην συνέχεια, για την αξιολόγηση των βέλτιστων γαλακτωμάτων χρησιμοποιήθηκαν τεχνικές όπως η μικροσκόπηση (παρατήρηση μεγέθους σταγονιδίων ελαίου) και φασματοφωτομετρία FT-IR με σκοπό τον προσδιορισμό των χαρακτηριστικών κορυφών των αμινοξέων που επηρεάζουν την γαλακτωματοποιητική ικανότητα. Πραγματοποιήθηκε ενσωμάτωση αντιοξειδωτικών στα βέλτιστα γαλακτώματα και μελέτη της κινητικής των οξειδωτικών φαινομένων με μετρήσεις για τον προσδιορισμό της υπεροξείδωσης των λιπιδίων με τις μεθόδους T-bars assay, peroxide value και συζυγή διένια.
Από τις παραπάνω αναλύσεις συμπεράναμε πως τα βέλτιστα (ποιοτικά) χαρακτηριστικά ήταν στα γαλακτώματα που παρασκευάστηκαν με πρωτεΐνη σόγιας και μπιζελιού σε περιοχές pH οι οποίες είναι απομακρυσμένες από το ισοηλεκτρικό τους σημείο (pH 2, 8). Η χρήση υδραλκοολικού διαλύματος σε αντικατάσταση της υδατική φάση βοήθησε στην δημιουργία καλύτερων γαλακτωμάτων σε τιμές pH αντίστοιχες των υδατικών.
Ακολούθησε αξιολόγησή των βέλτιστων γαλακτωμάτων με μικροσκοπική παρατήρηση, προσδιορίστηκε η σταθερότητα τους στην διάρκεια του χρόνου και μετρήθηκαν δείκτες προσδιορισμού των μεταβολών των ποιοτικών τους χαρακτηριστικών σε διάρκεια 7 ημερών παρουσία ή μη βιοδραστικών συστατικών από την ύπαρξη του εκχυλίσματος.
Η μικροσκόπηση των γαλακτωμάτων αποτυπώνει με ευκρίνεια την κατάλληλη ή μη διασπορά των λιπαρών μέσα στην υδατική φάση μέσου του μεγέθους των σταγονιδίων αξιολογώντας τόσο τις διαφορετικές τιμές pH όσο και το είδος της χρησιμοποιούσας πρωτεΐνης σε διαφορετικές συγκεντρώσεις.
Σύμφωνα με την μέθοδο FT-IR σε συνδυασμό με το pH παρατηρούνται μεταβολές στις τιμές των κορυφών που αποδίδονται σε εύρος 3700-2955 cm-1, 2955-2700 cm-1 και 1800-1530 cm-1. Οι μεταβολές αυτές παρατηρούνται εντονότερα στην πρωτεΐνη σόγιας η οποία παρουσιάζει καλύτερες γαλακτωματοποιητικές ιδιότητες.
Τέλος, η συνύπαρξη των πολυφαινολών σε συνδυασμό με την πρωτεΐνη σόγιας συνδράμει στην μείωση των οξειδωτικών φαινομένων ανεξάρτητα από το είδος του ελαίου. Αντίθετα η ποσότητα του ελαίου παίζει καθοριστικό ρόλο στην εμφάνιση των οξειδωτικών φαινομένων, το οποίο είναι λογικό καθώς αποτυπώνονται σε ποσοστό γαλακτώματος και όχι σε ποσοστό λιπαρής φάσης.
Abstract
In this diplomatic study, four different types of commercial protein formulations of plant origin (soybeans, peas, faba beans, rice) were evaluated for their use as emulsifiers in the preparation of stable oil in water emulsions. Simultaneously, the use of fruit extract (sour cherries) as a natural antioxidant was investigated for the study of emulsion fat oxidation inhibition.
The factors investigated in the emulsions concern their preparation conditions (oil concentration, protein concentration and environmental conditions), their stability over time, and the oxidation factors of fats in the presence or absence of antioxidant compounds. So far, the methods of creating emulsions, the various methods of receiving plant-derived proteins, and the stability of the emulsions at different times have all been studied in the literature. However, there is not enough literature referring to commercial protein formulations.
The solubility and absorption capacity of proteins in oil, water, and their replacement by hydro alcoholic solution were investigated during the experiment. Indicators of emulsifying stability index (ESI) and emulsifying activity index (EAI) were also measured. Then, to determine the characteristic peaks of amino acids that affect emulsification capacity, techniques such as microscopy (oil droplet size observation) and FT-IR spectrophotometry were used to evaluate the optimal emulsions. The incorporation of antioxidants into optimal emulsions and the investigation of the kinetics of oxidative phenomena were carried out using measurements for lipid oxidation using the T-bars assay, peroxide value, and conjugate dienes.
Based on the results of the preceding analyses, we concluded that the best emulsions were those made with soy and pea protein in pH areas far from their isoelectric point (pH 2, pH 8). The use of a hydro alcoholic solution in place of the aqueous phase aided in the creation of better emulsions with aqueous pH values.
Following that, the optimal emulsions were evaluated using microscopic observation, their stability over time was determined, and indicators were measured to determine changes in their qualitative characteristics over a 7-day period in the presence or absence of non-bioactive components of the extract.
By evaluating both the different pH values and the type of protein used at different concentrations, emulsion microscopy clearly captures the appropriate or inappropriate dispersion of fats within the aqueous phase through the size of droplets.
According to the FT-IR method in combination with pH, changes in characteristic adsorption peaks are observed in the ranges of 3700-2955 cm-1, 2955-2700 cm-1 and 1800-1530 cm-1. These changes are observed more intensely in soybean protein which shows better emulsifying properties.
Finally, the coexistence of polyphenols in combination with soy protein contributes to the reduction of oxidative phenomena regardless of the type of oil. On the contrary, the amount of oil has a decisive role in the occurrence of oxidative phenomena, which is logical as they are reflected in the percentage of emulsion and not in the percentage of fatty phase.