Κυτταροβιολογική μελέτη των ερυθροκυττάρων σε ασθενείς με Μυελοδυσπλαστικά Σύνδρομα

Δεμιρτζόγλου, Κωνσταντίνα

Cytobiological study on erythrocytes in patients of Myelodisplastic Syndromes

Πτυχιακή εργασία

Author

Δεμιρτζόγλου, Κωνσταντίνα

Date

2023-03-03

Advisor

Georgatzakou, Chara

Διπλωματική Εργασία (3.386Mb)

Keywords

Ερυθρόπτωση ; Οξειδωτικό στρες ; Γήρανση ; Αποπτωτικοί δείκτες ; Μυελοδυσπλαστικά σύνδρομα ; Κυτταρομετρία ροής ; Ερευνητική μελέτη ; Αποτελέσματα

Abstract

Η ερυθρόπτωση ή αλλιώς προγραμματισμένος κυτταρικός θάνατος , περιγράφει τη διαδικασία που ακολουθεί το κύτταρο πριν επέλθει ο φυσιολογικός του θάνατος από φυσική φθορά και την τελική του φαγοκυττάρωση από ειδικά κύτταρα του οργανισμού. Το οξειδωτικό στρες από την άλλη οφείλεται σε ανισορροπία παραγωγής και απομάκρυνσης των οξειδωτικών μορίων , και αναστολής ή αδράνειας του αντίστοιχου αντιοξειδωτικού μηχανισμού άμυνας . Οι δύο αυτές καταστάσεις συνδέονται άμεσα μεταξύ τους καθώς η πρώτη είναι απόρροια της δεύτερης και η δεύτερη αποτελεί έναν από τους αποπτωτικούς δείκτες των κυττάρων , μαζί με την έκφραση της PS στην εξωτερική στιβάδα της πλασματικής μεμβράνης , την αύξηση του κυτοσολικού ασβεστίου , τις ενεργοποιημένες κασπάσες-3 και τις ανοσοσφαιρίνες της τάξης IgG . Στόχος της συγκεκριμένης μελέτης αποτέλεσε η κυτταροβιολογική μελέτη των ερυθρών αιμοσφαιρίων , δηλαδή η εύρεση δεικτών ερυθρόπτωσης και οξειδωτικού στρες σε δείγματα αίματος ασθενών με μυελοδυσπλαστικά σύνδρομα , και η χρήση αυτών για την έγκαιρη και αξιόπιστη διάγνωση των νεοπλασιών. Οι αποπτωτικοί δείκτες της annexin-V PS , των ROS και των anti-IgG φάνηκαν να ανταποκρίνονται και να συμφωνούν με τα υπάρχοντα δεδομένα που είχαν μελετηθεί σε προηγούμενες έρευνες ανάλυσης τόσο της ερυθρόπτωσης και του οξειδωτικού στρες όσο και των ΜΔΣ .Σε αντίθεση με τους δείκτες των ενεργοποιημένων κασπασών-3 και των ενδοκυττάριων επιπέδων Ca+2 , όπου υπήρξε αύξηση μόνο στην μέτρηση του μέσου όρου-τυπική απόκλιση των παθολογικών έναντι των υγειών . Συμπερασματικά η κυτταροβιολογική μελέτη που έγινε στα ερυθρά αιμοσφαίρια των δύο πληθυσμών , ασθενών με ΜΔΣ και υγειών, μπόρεσε να αποδείξει την επίδραση και τον τρόπο λειτουργείας των παραμέτρων που αναλύθηκαν στις συγκεκριμένες συνθήκες που επικρατούσαν . Σε ορισμένες από αυτές κατάφερε να επιβεβαιώσει τη δράση τους στην διαδικασία του προγραμματισμένου κυτταρικού θανάτου βάση της υπάρχουσας βιβλιογραφίας , ενώ σε άλλες υπήρξαν εικασίες και πιθανά ενδεχόμενα συμμετοχής στα συγκεκριμένα μυελοειδή σύνδρομα .

Abstract

Eryptosis or programmed cell death describes the process that is followed by the cell itself before its natural death caused by natural wear and tear occurs and its final phagocytosis by special cells of the organism. Oxidative stress, on the other hand, is caused by an imbalance between the production and the removal of oxidative molecules and the inhibition or inactivity of the respective anti-oxidant defence mechanism. These two conditions are directly interconnected as the former results from the latter while the latter constitutes one of the apoptotic markers of the cells, in addition to the expression of PS on the outer layer of plasma membrane, the rise of cytosolic calcium, the activated caspases-3 and the IgG class immunoglobulins. This study aimed to serve as a cyto-biological study of red blood cells, that is, to help the finding of eryptosis markers and oxidative stress in blood samples of patients with myelodysplastic syndromes, as well as their usage for early and reliable diagnosis of neoplasms. Apoptotic markers of annexin-V PS, ROS and anti-IgG seem to have been responsive and in line with already existing data that had been studied in previous analyses both on eryptosis and oxidative stress and on MDS. In contrast to that, activated caspases-3 markers and intracellular levels of Ca+2 demonstrated some increase only in the measurement of mean – standard deviation of pathological versus healthy populations. Conclusively, the cyto-biological study that was carried out on red blood cells of the two populations, patients with MDS and healthy ones, has been able to prove the influence and the operation of those parameters that were analysed under these specific conditions. In some cases, this study even managed to corroborate their role in the process of programmed cell death based on existing bibliography, while in other cases there were only conjectures on their potential participation in these myeloid syndromes.