Show simple item record

Αιμοσυμβατότητα νανοσωματιδίων σχεδιασμένα για φορείς φαρμάκων

dc.contributor.advisorKriebardis, Anastasios
dc.contributor.authorΚοσμά, Μαρία-Ασπασία
dc.date.accessioned2024-10-09T07:29:34Z
dc.date.available2024-10-09T07:29:34Z
dc.date.issued2024-10-01
dc.identifier.urihttps://polynoe.lib.uniwa.gr/xmlui/handle/11400/7633
dc.identifier.urihttp://dx.doi.org/10.26265/polynoe-7465
dc.description.abstractΕισαγωγή: Η ραγδαία ανάπτυξη της νανοτεχνολογίας ενισχύεται με την ευρεία χρήση των νανοσωματιδίων σε όλο και περισσότερες εφαρμογές των βιοϊατρικών επιστημών. Η χρήση των πολυμερικών νανοσωματιδίων συνιστάται για τη μεταφορά θεραπευτικών ουσιών. Στη συγκεκριμένη διπλωματική εργασία μελετήθηκαν πολυμερικά νανοσυστήματα αλγινικού με εγκλωβισμένη ουσία τη χρυσίνη, τα οποία παρασκευάστηκαν με τη συνθετική μέθοδο της ιοντοτροπικής πηκτωμάτωσης. Η χρυσίνη (ChR) ανήκει στην οικογένεια των φλαβονοειδών και ξεχωρίζει για τις αντικαρκινικές και αντιοξειδωτικές της ιδιότητες. Το βασικό της μειονέκτημα είναι ο χαμηλός βαθμός βιοδιαθεσιμότητας, χαρακτηριστικό που αντισταθμίζεται με τον εγκλωβισμό της στα πολυμερικά νανοσωματίδια αλγινικού. Το αλγινικό (ALG) είναι ένας υδροφιλικός πολυσακχαρίτης, ο οποίος θεωρείται μη τοξικός και διακρίνεται για ιδιότητες όπως η βιοσυμβατότητα, η βιοαποικοδομησιμότητα, η βλεννοσυγκολλητική δράση καθώς και για τη διαδεδομένη χρήση του στις φαρμακευτικές εφαρμογές. Η αλληλεπίδραση των νανοσυστημάτων με τα ερυθρά αιμοσφαίρια, που αποτελούν την πολυπληθέστερη ομάδα των κυττάρων του αίματος, μπορεί να οδηγήσει σε αλλαγές στη δομή, τη μορφολογία, τη λειτουργικότητα και τη βιωσιμότητα των κυττάρων. Σκοπός: Σκοπός της εργασίας ήταν η αξιολόγηση της αιμοσυμβατότητας των ερυθρών αιμοσφαιρίων έπειτα από την επίδραση των πολυμερικών νανοσυστημάτων αλγινικού με εγκλωβισμένη ουσία τη χρυσίνη ( ChR – ALG NPs). Η εξασφάλιση της ελαχιστοποίησης της τοξικής δράσης των συγκεκριμένων νανοσυστημάτων στην κυκλοφορία του αίματος, αποτελεί το βασικό κριτήριο για τη μελλοντική χρήση τους ως φορείς φαρμάκων. Υλικά και Μέθοδοι: ChR-ALG NPs παρασκευάστηκαν χρησιμοποιώντας τη μέθοδο ιοντοτροπικής πηκτωμάτωσης και χαρακτηρίστηκαν με διάφορες αναλυτικές τεχνικές: θερμοσταθμική ανάλυση, φασματοσκοπία υπέρυθρου μετασχηματισμού Fourier, ηλεκτρονική μικροσκοπία διέλευσης, δυναμική σκέδαση φωτός και ανάλυση παρακολούθησης νανοσωματιδίων. Για τον έλεγχο της αιμοσυμβατότητας, ερυθροκύτταρα από υγιείς αιμοδότες επωάστηκαν στους 37οC υπό ανάδευση με: (α) ChR-ALG NPs, (β) ALG NPs, και (γ) ChR για 4 ώρες. Ερυθροκύτταρα χωρίς επώαση με NPs και ερυθροκύτταρα ύστερα από επώαση με PBS στους 37οC χαρακτηρίστηκαν ως εσωτερικοί μάρτυρες. Μετρήθηκε η ελεύθερη αιμοσφαιρίνη πλάσματος, η ωσμωτική και μηχανική ευθραυστότητα, η επιδεκτικότητα σε εξωγενές οξειδωτικό ερέθισμα και η κρυοαιμόλυση. Ακόμη, μετρήθηκαν με κυτταρομετρία ροής τα επίπεδα των ενδοκυττάριων ελεύθερων οξειδωτικών ριζών (iROS) καθώς και η εξωτερίκευση της φωσφατιδυλοσερίνης (PS) και των ενδοκυττάριων κατιόντων iCa+2. Η μορφολογία των ερυθροκυττάρων αξιολογήθηκε με μικροσκοπία. Η στατιστική επεξεργασία των αποτελεσμάτων έγινε με το SPSS v.27. Αποτελέσματα: Τα ChR-ALG NPs είχαν μέγεθος 122,7±7,3nm, με καλή διασπορά μεγέθους και ικανοποιητική σταθερότητα σε αιώρημα. Όλα τα NPs προκάλεσαν αιμόλυση (ChR-ALG NPs:p=0,0020, ALG NPs:p=0,0020 και ChR:p=0,0156) των ερυθροκυττάρων και φάνηκε να τα καθιστούν ευθραυστότερα σε οξειδωτικό ερέθισμα (ChR-ALG NPs: p=0,0078, ALG NPs: p=0,0068 και ChR: p=0,0195). Παρουσία ChR τα ερυθροκύτταρα ήταν πιο επιρρεπή στο μηχανικό ερέθισμα (p=0,0234) ενώ η ωσμωτική αντίσταση και η κρυοαιμόλυση δεν επηρεάστηκαν από την παρουσία NPs. Αύξηση του αριθμού των ακανθοκυττάρων παρατηρήθηκε παρουσία ChR-ALG NPs και ALG NPs (p=0,0085 και p=0,0005 αντίστοιχα). Τα ερυθροκυτταρικά iCa2+ και η PS ήταν στατιστικά σημαντικά υψηλότερα παρουσία όλων των NPs συγκριτικά με τους μάρτυρες (p<0,005). Τέλος η ChR φάνηκε να αυξάνει τα ερυθροκυτταρικά iROS σε σχέση με τους μάρτυρες (p=0,0067). Συζήτηση: Η μελέτη παρέχει νέα γνώση σχετικά με την αιμοσυμβατότητα των ChR-ALG NPs, τονίζοντας τη σημασία της αξιολόγησης πιθανών δυσμενών επιπτώσεων στα ερυθροκύτταρα κατά το σχεδιασμό νανοσωματιδίων για εφαρμογές χορήγησης φαρμάκων. Απαιτούνται πρόσθετες μελέτες για την κατανόηση των πιθανών πλεονεκτημάτων των ChR-ALG NPs για τη βελτιστοποίηση της σύνθεσής τους με βάση την προβλεπόμενη χρήση τους.el
dc.format.extent105el
dc.language.isoelel
dc.publisherΠανεπιστήμιο Δυτικής Αττικήςel
dc.rightsΑναφορά Δημιουργού - Μη Εμπορική Χρήση - Παρόμοια Διανομή 4.0 Διεθνές*
dc.rightsAttribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 Διεθνές*
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/*
dc.subjectΠολυμερικά νανοσυστήματαel
dc.subjectΑλγινικό οξύel
dc.subjectΧρυσίνηel
dc.subjectΕγκλωβισμόςel
dc.subjectΒιοδιαθεσιμότηταel
dc.subjectΑιμοσυμβατότηταel
dc.subjectΕρυθρόπτωσηel
dc.subjectΑιμόλυσηel
dc.subjectΕρυθρά αιμοσφαίριαel
dc.titleΑιμοσυμβατότητα νανοσωματιδίων σχεδιασμένα για φορείς φαρμάκωνel
dc.title.alternativeHemocompatibility of nanoparticles designed for drug carriersel
dc.typeΜεταπτυχιακή διπλωματική εργασίαel
dc.contributor.committeeFortis, Sotirios
dc.contributor.facultyΣχολή Επιστημών Υγείας & Πρόνοιαςel
dc.contributor.departmentΤμήμα Βιοϊατρικών Επιστημώνel
dc.contributor.masterΒιοϊατρικές Μέθοδοι και Τεχνολογία στη Διάγνωσηel
dc.description.abstracttranslatedIntroduction: The rapid development of nanotechnology has been induced by the use of nanomaterials in a wide range of biomedical applications. Polymeric nanoparticles are considered to be ideal candidates for drug delivery. This research project focuses on the alginate-based nanoparticles loaded with chrysin. They had been manufactured using ionic gelation method. Chrysin (ChR) is a flavone that possesses antioxidant and anticancer properties. However, its limited solubility results in poor bioavailability, an issue that can be resolved by its entrapment in the alginate-based nanoparticles. Alginate (ALG) is a hydrophilic polysaccharide that is non-toxic. This polymer is also biocompatible, biodegradable and presents mucoadhesive properties, among its pharmaceutical applications. The interaction between the nanoparticles and red blood cells could possibly affect the structure, morphology, functionality and viability of the cells. Purpose: The aim of this study was to evaluate the hemocompatibility of red blood cells after exposure to alginate nanoparticles loaded with chrysin (ChR-ALG NPs). Ensuring hemocompatibility and low levels of toxicity is of outmost significance when developing novel nanoparticles, designed for drug carriers. Method: ChR – ALG NPs were manufactured using ionic gelation method and were also characterized with different analytical techniques: thermogravimetry, Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR), transmission electron microscopy (TEM), dynamic light scattering (DLS) and observative analysis of nanoparticles (NPs). For the hemocompatibility control, RBCs were obtained from healthy volunteers and were incubated at 37ο C, under stirring, with the presence of: a) ChR - ALG NPs, b) ALG NPs and c) ChR, for 4 hours. RBCs with no incubation and RBCs with incubation with PBS at 37ο C, were used as internal control. The free hemoglobin plasma concentration, osmotic and mechanical fragility, susceptibility to oxidative stress and cryohemolysis were estimated. Therefore, the levels of intracellular reactive oxygen species (iROS) and the percentage of the phosphatidylserine’s (PS) and intracellular calcium cations (Ca+2) externalization were measured. Last but not least, the RBCs’ morphology was evaluated by microscopy. SPSS v.27 was used for the data analysis. Results: The size of ChR – ALG NPs was measured at 122,7 ± 7,3 nm, with good size distribution and an adequate stability in suspension. All NPs had hemolytic properties (ChR-ALG NPs: p=0,0078, ALG NPs: p=0,0068 and ChR: p=0,0195). RBCs were more sensitive to oxidative stress ((ChR-ALG NPs: p=0,0078, ALG NPs: p=0,0068 και ChR: p=0,0195) and were also prone to mechanical stress (p=0,0234), in the presence of chrysin. Osmotic fragility index and cryohemolysis were not affected by the interaction with NPs. Microscopic observation demonstrated an increased number of acanthocytes after the incubation with ChR – ALG NPs and ALG NPs (p=0,0085 και p=0,0005 respectively). The levels of intracellular Ca+2 and the percentage of PS externalization were statically higher than the controls (p<0,005). Last but not least, chrysin was found able to increase the iROS levels, compared to controls (p=0,0067). Discussion: The study provides valuable insights into the hemocompatibility of the ChR – ALG NPs, emphasizing on the consequences of their interaction with blood cells. The polymeric nanoparticles’ behavior in blood circulation should be more investigated, so that they can be widely used as drug carriers.el


Files in this item

Thumbnail

This item appears in the following Collection(s)

Show simple item record

Αναφορά Δημιουργού - Μη Εμπορική Χρήση - Παρόμοια Διανομή 4.0 Διεθνές
Except where otherwise noted, this item's license is described as
Αναφορά Δημιουργού - Μη Εμπορική Χρήση - Παρόμοια Διανομή 4.0 Διεθνές