Ανίχνευση της μετάλλαξης πολυμορφισμού HLA-Β*5701 που ευθύνεται για την εκδήλωση υπερευαισθησίας στην αβακαβίρη σε άτομα με τον ιό HIV

Γιγουρτσή, Παναγιώτα Αρετή

Detection of the polymorphism HLA-B*5701 mutation which is responsible for hypersensitivity to abacavir in people living with HIV (PLWH)

Πτυχιακή εργασία

Author

Γιγουρτσή, Παναγιώτα Αρετή

Date

2024-07-18

Advisor

Beloukas, Apostolos

Πτυχιακή Εργασία (1.335Mb)

Keywords

Hiv ; Aids ; Αβακαβίρη ; Υπερευαισθησία ; HLA*B57:01

Abstract

Εισαγωγή: Η παρούσα εργαστηριακή εργασία εξετάζει ένα κρίσιμο σημείο πριν την έναρξη της φαρμακευτικής αγωγής των ατόμων που ζουν με τον ιό HIV (PLWH), που αφορά την αντίδραση υπερευαισθησίας στην αβακαβίρη. Η συγκεκριμένη προπτυχιακή έρευνα εστιάζει στην ανίχνευση του γονιδίου HLA-B57 και του πολυμορφισμού HLA-Β*5701, ο οποίος αποτελεί τον κύριο δείκτη προδιάθεσης για την συγκεκριμένη ευαισθησία. Η αβακαβίρη είναι ένας νουκλεοσιδικός αναστολέας της ιικής αντίστροφης μεταγραφάσης (NRTI) του ιού που συσχετίζεται σημαντικά με αντιδράσεις υπερευαισθησίας, με αποτέλεσμα να καθίσταται αναγκαίος ο προληπτικός έλεγχος ύπαρξης του αλληλομόρφου, για την ασφάλεια των ασθενών και την αποτελεσματικότητα της θεραπείας. Σκοπός: Ο κύριος στόχος αυτής της μελέτης είναι η καθιέρωση μιας λειτουργικής και αξιόπιστης μεθόδου για την ανίχνευση του πολυμορφισμού HLA-Β*5701, ώστε να γίνεται εντοπισμός των ατόμων που εμφανίζουν ευαισθησία στον συγκεκριμένο αναστολέα του ιού του HIV. Η συγκεκριμένη εργαστηριακή έρευνα σκοπεύει στο να προσφέρει πολύτιμες γνώσεις για μια εξατομικευμένη αναγνώριση μοριακού υπόβαθρου ώστε να βελτιστοποιούνται τα θεραπευτικά αποτελέσματα και να μειώνονται οι δυσμενείς αντιδράσεις. Μέθοδος: Η μεθοδολογία της μελέτης συνδυάζει μοριακές τεχνικές, όπως η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (PCR), πρωτόκολλα απομόνωσης γενετικού υλικού και ηλεκτροφορήσεις. Στην έρευνα χρησιμοποιήθηκαν δείγματα ατόμων που έχουν μολυνθεί με τον ιό HIV ώστε να εκτιμηθεί το ποσοστό εμφάνισης του συγκεκριμένου πολυμορφισμού και για να καταγραφούν δεδομένα που αφορούν την γεωγραφική προέλευση, το ιικό φορτίο, την κατανομή του πολυμορφισμού, ακόμα και το φύλο των ατόμων. Αποτελέσματα: Στην ενότητα αυτή καταγράφονται τα αποτελέσματα του πρωτοκόλλου που ακολουθήθηκε για τα δείγματα που εξετάστηκαν και διάφορα στατιστικά στοιχεία που πιθανόν να αφορούν το συγκεκριμένο γονίδιο και το αλληλόμορφο που ευθύνεται για την αντίδραση υπερευαισθησίας. Επιπλέον, αναλύεται η αποτελεσματικότητα της πειραματικής μεθόδου. Συζήτηση: Σε αυτό το σημείο αξιολογούνται οι επιπτώσεις των αποτελεσμάτων, εξετάζοντας την κλινική σημασία του ελέγχου HLA-Β*5701 στον περιορισμό της υπερευαισθησίας. Παράλληλα αναφέρονται προβληματισμοί και δυσκολίες που προέκυψαν κατά τι διενέργεια του πρωτοκόλλου ώστε στο τέλος να επισημανθούν οι προκλήσεις, οι ηθικές διαστάσεις και ο ευρύτερος αντίκτυπος στην εξατομικευμένη ιατρική για τη θεραπεία του HIV.

Abstract

Introduction: This research thesis examines the crucial area of hypersensitivity to Ab acavir in people living with HIV (PLWH), focusing on identifying the HLA-B*5701 polymorphism as a predisposing genetic marker. Abacavir in an antiretroviral drug that acts against the Reverse Transcriptase of HIV and belongs to the NRTIs drug category. It has shown a significant association with hypersensitivity reactions, underscoring the necessity of preemptive screening for patient safety and treatment efficacy. Purpose: The primary goal of this study is to develop a reliable method for detecting the HLA-B*5701 polymorphism, facilitating the identification of individuals suscepti ble to Abacavir hypersensitivity. This research aims to provide valuable insights for a molecular basis of personalized detection, optimizing therapeutic outcomes and mini mizing adverse reactions. Method: The study's methodology combines molecular techniques such as Polymerase Chain Reaction (PCR), DNA extraction, and electrophoresis to detect the HLA-B*5701 polymorphism. The research involves a cohort of samples from people living with HIV (PLWH), assessing the frequency of this genetic polymorphism, recording ethnic and sex variations. Results: The results section records the prevalence rates of the HLA-B*5701 polymor phism within the selected group of PLWH. It analyses the effectiveness of the screening method and provides data for understanding the genetic landscape associated with hy persensitivity to Abacavir. Discussion: The discussion evaluates the implications of the findings, examining the clinical significance of the HLA-B*5701 screening in limiting hypersensitivity. Chal lenges, ethical considerations, and the broader impact on personalized medicine for HIV treatment are highlighted. This thesis endeavours to contribute not only to the sci entific understanding of genetic markers related to drug hypersensitivity but also to the practical implementation of personalized medicine in the context of HIV treatment.