Πρωτεομική ανάλυση στελεχών τρίχας σε ενεργό φάση αύξησης παιδιατρικών ασθενών με Διαβήτη τύπου 1

Abstract

ΠΕΡΙΛΗΨΗ

ΕΙΣΑΓΩΓΗ-ΣΚΟΠΟΣ: Μελέτες έχουν δείξει ότι η αυτοανοσία στους ασθενείς με σακχαρώδη διαβήτη τύπου 1 (ΣΔτ1) ξεκινάει αρκετό διάστημα πριν την εμφάνιση των κλινικών εκδηλώσεων. Η τρίχα στον άνθρωπο επιμηκύνεται κατά 1 cm ανά μήνα. Κατά την ανάπτυξη της τρίχας ενσωματώνονται ποικίλα ενδογενή μόρια με αποτέλεσμα ένα δείγμα τρίχας να μπορεί να παρέχει ένα προφίλ σε πρωτεΐνες που αντανακλά την έκθεση της σε μήνες. Ο σκοπός της παρούσας μελέτης είναι να ταυτοποιηθεί το πρωτεομικό προφίλ σε δείγματα τρίχας μήκους 1 cm σε κορίτσια με πρωτοδιάγνωστο ΣΔ1, καθώς και η ανίχνευση του πεπτιδίου C στα μη διαβητικά άτομα .

ΥΛΙΚΟ-ΜΕΘΟΔΟΙ: Τριάντα-δύο κορίτσια με πρωτοδιάγνωστο ΣΔ1 και τριάντα υγιή κορίτσια στρατολογήθηκαν με καταγραφή κλινικοεργαστηριακών δεδομένων. Τα δείγματα τριχών συλλέχθηκαν από την οπίσθια κορυφή του κρανίου με τη χρήση ψαλιδιού όσο το δυνατόν πλησιέστερα στη ρίζα της τρίχας και αποκόπησαν τα πρώτα 6 cm ανά 1 cm από κάθε κορίτσι. Οι πρωτεΐνες της τρίχας ανά εκατοστό απομονώθηκαν πιλοτικά για 36 δείγματα από 3 κορίτσια με ΣΔτ1 και 3 υγιή κορίτσια. Η πέψη τους πραγματοποιήθηκε σύμφωνα με το πρωτόκολλο Sp3. Τα πεπτίδια διαχωρίστηκαν με υγρή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης συζευγμένη με φασματόμετρο μάζας Q Exactive HF-Χ για την ταυτοποίηση και ποσοτικοποίηση τους με το λογισμικό DIANN. Η στατιστική και βιοπληροφορική ανάλυση των δεδομένων έγινε με τα λογισμικά Perseus και Metascape.

ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΑ: Ταυτοποιήθηκαν 1799 πρωτεΐνες από τα 36 δείγματα εκ των οποίων 346 πρωτεΐνες ήταν στατιστικώς σημαντικές. Σε όλα τα δείγματα μήκους 1 cm, οι ασθενείς με ΣΔ1 παρουσίασαν διαφορετική έκφραση στις πρωτεΐνες των κερατινών, της οικογένειας των ανοσοσφαιρινών (IGKC, IGHA1, IGHG1-3), του υποδοχέα των ιών coxsackie και αδενοϊού (CXADR) καθώς και σε πρωτεΐνες που σχετίζονται με διάφορους μοριακούς μηχανισμούς της παθοφυσιολογίας του ΣΔ1. Δεν έγινε ανίχνευση του πεπτιδίου C, σε κανένα απο τα δείγματα.

ΣΥΜΠΕΡΑΣΜΑΤΑ: Τα προκαταρκτικά αποτελέσματα έδειξαν διαφορές στο πρωτεομικό προφίλ των τριχών των κοριτσιών με ΣΔ1 σε σύγκριση με τα υγιή κορίτσια. Η μελέτη επιβεβαιώνει ότι η αυτοανοσία ξεκινάει τουλάχιστον 6 μήνες πριν την εμφάνιση των κλινικών εκδηλώσεων.