Μοριακή ταυτοποίηση βακτηριακών στελεχών Pseudomonas aeruginosa απομονωμένων από δείγματα κολυμβητικών δεξαμενών

Abstract

Η κολύμβηση και άλλες δραστηριότητες που λαμβάνουν χώρα σε νερά αναψυχής, όπως οι κολυμβητικές δεξαμενές, προσφέρουν ψυχική και σωματική υγεία. Ωστόσο, υπάρχουν και αρκετοί κίνδυνοι. Οι κολυμβητικές δεξαμενές αποτελούν πηγή ποικίλων παθογόνων μικροοργανισμών και σε ετήσια βάση καταγράφονται αρκετά περιστατικά λοιμώξεων που σχετίζονται με τη χρήση τους. Ένα από τα βακτήρια που εντοπίζεται συχνά σε αυτά τα περιβάλλοντα και ευθύνεται για πλήθος λοιμώξεων είναι η Pseudomonas aeruginosa. Σύμφωνα με τον Παγκόσμιο Οργανισμό Υγεία (ΠΟΥ) η P. aeruginosa προτείνεται ως δείκτης μικροβιολογικής ποιότητας των κολυμβητικών δεξαμενών ενώ κρίνεται σημαντική η μελέτη των μηχανισμών αντοχής της. Επομένως, σκοπός της παρούσας πτυχιακής εργασίας ήταν η μοριακή ταυτοποίηση και ο έλεγχος ευαισθησίας σε αντιβιοτικά των στελεχών P. aeruginosa που ανακτήθηκαν από δείγματα νερού κολυμβητικών δεξαμενών. Δέκα οχτώ ύποπτα στελέχη P. aeruginosa που είχαν απομονωθεί από δείγματα νερού διαφόρων κολυμβητικών δεξαμενών και είχαν φυλαχθεί σε κατάλληλες συνθήκες στο αρχείο βιολογικών δειγμάτων του Εργαστήριου Μοριακής Μικροβιολογίας και Ανοσολογίας του Πανεπιστημίου Δυτικής Αττικής, υποβλήθηκαν α) σε ταυτοποίηση εφαρμόζοντας τη μοριακή μέθοδο της PCR για την ανίχνευση του γονίδιου της 16S ριβοσωμικής υπομονάδας και β) σε έλεγχο μικροβιακής ευαισθησίας σε 11 ευρέως χρησιμοποιούμενα αντιβιοτικά με τη μέθοδο διάχυσης δίσκων αντιβιοτικών σε άγαρ (Kirby Bauer). Τα αποτελέσματα της 16S PCR έδειξαν πως 15 από τα 18 (83%) στελέχη ανήκαν στο γένος Pseudomonas εκ των οποίων 9 (9/15, 60%) ανήκαν στο είδος P. aeruginosa. Τα υπόλοιπα τρία στελέχη αποκλείστηκαν από την μελέτη. Βάσει των επιδημιολογικών ορίων (EUCAST/ECOFF) 11 από τα 15 (73%) στελέχη Pseudomonas spp, συμπεριλαμβανομένων των P. aeruginosa, χαρακτηρίστηκαν ως ανθεκτικά. Από τα 11 ανθεκτικά στελέχη τα 5 (45%) εμφάνισαν συνδυαστική αντοχή σε κεφαλοσπορίνες 3ης γενιάς, μονομπακτάμες και καρβαπενέμες. Συμπερασματικά, η ανίχνευση στελεχών P. aeruginosa στα υπό μελέτη δείγματα νερού κολύμβησης είναι ανησυχητική, καθώς η παρουσία τους αποτελεί ένδειξη επιμόλυνσης των συγκεκριμένων υδάτων. Παράλληλα, η εμφάνιση ανθεκτικών στελεχών P. aeruginosa ακόμα και σε καρβαπενέμες, που είναι τα πιο ισχυρά αντιβιοτικά που διαθέτουμε μέχρι στιγμής, υπογραμμίζει τον κίνδυνο ανάπτυξης ανίατων λοιμώξεων ειδικά για τους χρήστες κολυμβητικών δεξαμενών που ανήκουν σε ευπαθείς ομάδες.