Ανάλυση ρυθμιστικών μορίων miRNAs που εμπεριέχονται στα εξωσώματα υγιών και μολυσμένων με λεϊσμάνια σκύλων

Abstract

Η πτυχιακή αυτή εργασία επικεντρώνεται στη μελέτη των miRNA ως βασικών ρυθμιστικών μορίων στις κυτταρικές λειτουργίες και την εμπλοκή τους στη λοίμωξη από το παράσιτο λεϊσμάνια. Οι διάφορες μορφές της λεϊσμανίασης επηρεάζουν ανθρώπους και ζώα, με την Canine Leishmaniasis (CanL) να αποτελεί σοβαρό κτηνιατρικό και ανθρώπινο ζήτημα στις χώρες της λεκάνης της Μεσογείου. Οι περίπλοκοι μοριακοί μηχανισμοί παθογένεσης και οι δυσκολίες στη θεραπεία, όπως για παράδειγμα η ανάπτυξη ανθεκτικών στελεχών και η έλλειψη αποτελεσματικών εμβολίων, υπογραμμίζουν την ανάγκη εκτεταμένης έρευνας για την αντιμετώπισή της. Τα miRNA, μέσω της αλληλεπίδρασής τους με mRNA, ρυθμίζουν τη γονιδιακή έκφραση και εμπλέκονται στην ανοσολογική απόκριση, ενώ τα εξωσώματα αποτελούν φορείς που μεταφέρουν miRNA και άλλα βιοδραστικά μόρια, τα οποία εμπλέκονται σε διάφορες βιολογικές διαδικασίες, όπως η ανοσολογική απόκριση και η πορεία της λοίμωξης. Η ανάλυση της διαφορικής έκφρασης των μορίων miRNA στην εργασία αυτή, βασίστηκε σε τεχνολογίες αλληλούχισης επόμενης γενιάς (NGS) για την ταυτοποίηση των miRNA στα εξωσώματα ορού υγιών και μολυσμένων σκύλων, με τη χρήση εργαλείων όπως το MiRDeep2 και τη στατιστική ανάλυση μέσω της γλώσσας R. Η μελέτη αποκάλυψε διαφορές στην έκφραση τους, που πιθανώς οφείλονται στη μόλυνση και ανέδειξε τη σημασία των miRNA ως βιοδεικτών για τη διάγνωση και την κατανόηση της παθογένειας της λεϊσμανίασης. Μεταξύ των πιο ανωρρυθμισμένων miRNAs σε μολυσμένα σκυλιά ήταν τα cfa-miR- 222, cfa-miR-92b, cfa-miR-29b, cfa-miR-129 και cfa-miR-486, τα οποία σχετίζονται με τη σηματοδότηση του ανοσοποιητικού και τις φλεγμονώδεις αποκρίσεις. Αντίθετα, βασικά κατωρρυθμισμένα miRNAs περιλάμβαναν τα cfa-miR-30b, cfa-miR-30c, cfamiR-107, cfa-miR-374b και cfa-miR-301a, πολλά από τα οποία εμπλέκονται στην ενεργοποίηση των μακροφάγων και στις Th1 ανοσολογικές αποκρίσεις.Η εργασία ενισχύει την κατανόηση της μοριακής αλληλεπίδρασης παρασίτου-ξενιστή και προσφέρει στοιχεία που θα μπορούσαν να συμβάλουν στην ανάπτυξη νέων θεραπευτικών προσεγγίσεων ή ακόμα και στη βελτίωση των εμβολίων για την πρόληψη της λεϊσμανίασης, ως μέρος μιας συνολικής προσπάθειας για την αντιμετώπιση μιας παραμελημένης τροπικής ασθένειας.